超微量分光光度計是一種用于微量生物分子檢測的分析儀器。設(shè)計用于測量微量樣本(通常為微升級別)中的核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度和純度。
超微量分光光度計基于紫外-可見光吸收光譜法,通過檢測特定波長下的吸光度來確定樣品中目標物質(zhì)的濃度。其核心理論基礎(chǔ)是朗伯-比爾定律,即當一束單色光穿過含有吸收物質(zhì)的溶液時,光強度的減弱程度與溶液的濃度和光穿過的路徑長度成正比。
超微量分光光度計的理論基礎(chǔ)是朗伯 - 比爾定律,即當一束平行單色光通過均勻、非散射的溶液時,溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(c)、光程(l)成正比,其數(shù)學(xué)表達式為 A=εcl,其中 ε 是物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)。儀器通過測量樣本的吸光度,在已知光程和吸光系數(shù)的情況下,就能計算出樣本的濃度。
結(jié)構(gòu)組成
樣品檢測平臺:通常由石英或高透光光學(xué)玻璃制成,表面經(jīng)過特殊處理以減少液體殘留,有固定式微量檢測槽和可移動式納米光程芯片等設(shè)計。
光源:常用氙閃光燈、脈沖式鎢燈或 LED 等,可發(fā)出覆蓋紫外和可見光區(qū)的全光譜復(fù)合光。
單色器:一般為光柵,可將復(fù)合光色散成不同波長的單色光,并篩選出特定波長的光導(dǎo)向樣本。
檢測器:多為光電二極管或 CCD 陣列,能將透過樣本的光信號轉(zhuǎn)換為電信號,以便計算吸光度。
主要特點
樣本用量少:只需 0.5-2μL 的樣品即可進行測量,適合處理珍貴或有限的樣品。
靈敏度高:短光程設(shè)計使其能檢測較低濃度的分析物,在靈敏度要求高的應(yīng)用中具有優(yōu)勢。
準確性高:減少了樣品處理和稀釋步驟,降低了錯誤風險,提高了測量準確性。
測量快速:無需稀釋樣品,可在幾秒鐘內(nèi)完成測量,節(jié)省時間和精力。